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抗體效價 - 抗體的物理狀態(tài)表示其免疫效果

抗體效價,指抗體的物理狀態(tài)及其在體內(nèi)的滯留時間,以其與抗原反應(yīng)的多少來表示其免疫效果。正常值的范圍是1:64。如果孕婦抗體效價太高,易患母兒血型不合溶血病。

檢測方法

多采免疫雙向擴(kuò)散法

基本原理

指抗原和抗體在同一凝膠內(nèi)都擴(kuò)散,彼此相遇后形成特異性的沉淀線。

將抗原與抗體分別加入同一凝膠板中兩個相隔一定間距的小孔內(nèi),使兩者進(jìn)行相互擴(kuò)散,當(dāng)抗原抗體濃度之比相適宜時,彼此相遇形成一白色弧狀沉淀線。

優(yōu)缺點(diǎn):簡便,但敏感性較低,易出現(xiàn)假陰性結(jié)果。

免疫雙向擴(kuò)散法的操作步驟

將玻璃板用水洗凈后用75%乙醇沖洗,晾干后放在水平臺上備用。

將1%agar融化后,置56℃水浴。

在玻璃板上鋪膠,約1.5mm厚,凝固后打孔(直徑3rnm),孔間距10mm。

抗血清(抗體預(yù)先作系列倍比稀釋即ml抗原樣品,周圍孔內(nèi)每孔加5m*中心孔加51:2、1:4、1:8、1:16、1:32等比例)。

凝膠板置濕盒內(nèi),室溫擴(kuò)散24h。

觀察結(jié)果。

凝聚胺法測定孕婦血清IgG抗-A(抗-B)效價的方法,待檢血清與0.2mol/L2硫基乙醇(2Me)在試管內(nèi)等量混合,放入37℃水浴1h以破壞血清中的IgM抗體,吸取處理后的血清用生理鹽水倍比稀釋,稀釋度分別為2、4、8、16、32、64、128、256、512、1024,然后每管加入相應(yīng)的3%~5%紅細(xì)胞懸液,置37℃水浴30min,觀察是否凝集,不凝集者用生理鹽水洗滌3次,然后加入低離子鹽水介質(zhì)(LIM液),混勻,滴入2滴凝聚胺,混勻后3000r/min離心30s,扣搖肉眼可見明顯的凝集(無凝集者須重做),再加入2滴重懸液,輕搖,觀察凝集是否消失,凝集1min內(nèi)不消失者表示受檢者血清中含有IgG型抗?A - 抗?B。

抗體效價檢測的其它方法

環(huán)狀沉淀試驗(yàn),需較多的抗血清,現(xiàn)已很少用;

對流免疫電泳,比瓊脂免疫雙擴(kuò)散法敏感,較簡便、實(shí)用;

酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。

通常抗體效價低于1:128是沒有問題的,有些孕婦高達(dá)1:256以上,而且抗體效價最好1個月查上一次,有時候會有所變化。

有關(guān)疾病

溶血病

母兒血型不合溶血病

新生兒溶血病是孕婦和胎兒之間血型不合而產(chǎn)生的同族血型免疫疾病,可發(fā)病于胎兒和新生兒的早期。當(dāng)胎兒從父方遺傳下來的顯性抗原恰為母親所缺少時,通過妊娠、分娩,此抗原可進(jìn)入母體,刺激母體產(chǎn)生免疫抗體。當(dāng)此抗體又通過胎盤進(jìn)入胎兒的血循環(huán)時,可使其紅細(xì)胞凝集破壞,引起胎兒或新生兒的免疫性溶血癥。這對孕婦無影響,但病兒可因嚴(yán)重貧血、心衰而死亡,或因大量膽紅素滲入腦細(xì)胞引起核黃疸而死亡,即使幸存,其神經(jīng)細(xì)胞和智力發(fā)育以及運(yùn)動功能等,都將受到影響。

母兒血型不合,主要有ABO和Rh型兩大類,其他如MN系統(tǒng)也可引起本病,但極少見。ABO血型不合較多見,病情多較輕,易被忽視。Rh血型不合在我國少見,但病情嚴(yán)重,常致胎死宮內(nèi)或引起新生兒核黃疸。

一、病因

ABO血型系統(tǒng)中,孕婦多為O型,父親及胎兒則為A、B或AB型。胎兒的A、B抗原即為致敏源。Rh血型中有6個抗原,分別為C、c、D、d、E、e,其中以D抗原性較強(qiáng)。致溶血率最高,故臨床上以抗D血清來檢驗(yàn)。當(dāng)母親或新生兒紅細(xì)胞與已知的抗D血清發(fā)生凝集,即為Rh陽性,反之則為陰性。Rh陰性的孕婦,偶亦可被其他抗原致敏而產(chǎn)生抗體,如抗E抗C抗體等,從而發(fā)生母兒血型不合。

胎兒紅細(xì)胞正常不能通過胎盤,僅在妊娠或分娩胎盤有破損時,絨毛血管內(nèi)胎兒紅細(xì)胞才能進(jìn)入母體,并根據(jù)進(jìn)入的量、致敏次數(shù),影響到抗體產(chǎn)生的多少及最后引起胎嬰兒溶血的輕重等。

血型抗體是一種免疫球蛋白,有IgG、IgM兩種。IgG分子量小(7S-r球蛋白),為不完全抗體(膠體介質(zhì)抗體或遮斷性抗體),能通過胎盤;而IgM分子量大(19S-γ球蛋白),為完全抗體(鹽水凝集抗體),不能通過胎盤。Rh、ABO血型抗體能通過胎盤起作用的是IgG。

二、病理及臨床表現(xiàn)

(一)因紅細(xì)胞破壞增加,網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)及肝、腎細(xì)胞可有含鐵血黃素沉著。

(二)骨髓及髓外造血組織呈代償性增生,肝脾腫大,鏡檢在肝、脾、肺、胰、腎等組織內(nèi)可見散在髓外造血灶。

(三)貧血導(dǎo)致心臟擴(kuò)大,血漿蛋白低下、全身蒼白、水腫、胸腹及心包等組織內(nèi)可同兇散在髓外造血灶。

(四)高膽紅素血癥可引起全身性黃疸及核黃疸。核黃疸多發(fā)生在基底核、海馬鉤回及蒼白球、視丘下核、尾狀核、齒狀核等處。神經(jīng)細(xì)胞變性,胞漿黃染,核消失。

輕癥者多無特殊癥狀,溶血嚴(yán)重者,可出現(xiàn)胎兒水腫、流產(chǎn)、早產(chǎn)甚至死胎。娩出后主要表現(xiàn)為貧血、水腫、肝脾腫大、黃疸及核黃疸。癥狀的輕重取決于抗體的多少、新生兒成熟度及代償性造血能力等。

三、診斷

主要依靠實(shí)驗(yàn)室的特異性抗體檢查。凡既往有流產(chǎn)、不明原因的死胎、輸血史或有新生兒重癥黃疸史者,均應(yīng)除外母兒血型不合可能。

孕婦產(chǎn)前應(yīng)常規(guī)查血型,如為O型,而其夫?yàn)锳、B、AB型者應(yīng)作特異性抗體檢查,陰性者提示已被致敏,Rh血型不合抗體效價>1:32,ABO血型不合抗體效價>1:512者提示病情嚴(yán)重。

有條件時可行羊水檢查,利用分光光度計,作羊水膽紅素吸光度分析,于450mμ處吸光度差(△OD450)>0.06為危險值;0.03~0.06警戒值;<0.03為安全值。孕36周以后,羊水膽紅素含量0.03>0.06mg%為正常值;>0.2mg%提示胎兒有溶血損害。

四、處理

(一)孕期處理

1.綜合療法

為提高胎兒抵抗力及膽紅素代謝能力,于孕24周、30周、33周各進(jìn)行10天綜合治療,方法如下:每日靜注50%葡萄糖40mg加維生素C100mg;吸氧,每日2~3次,每次15~20分鐘維生素E30mg,每日3次。必須時可延長治療時間及增加療程。約產(chǎn)前2周,每日口服苯巴比妥10~30mg,每日2~3次,可增強(qiáng)胎肝細(xì)胞葡萄糖醛酸轉(zhuǎn)移酶的活性,加強(qiáng)膽紅素代謝,以減少核黃疸發(fā)生機(jī)會。

2.中藥

茵陳蒿湯(茵陳9g、制大黃4.5g、黃芩9g、甘草6g)每日一劑煎服,至分娩。

3.引產(chǎn)

妊娠36周以后,遇下列情況可考慮引產(chǎn):①抗體效價:Rh血型不合抗體效價>1:32,ABO血型不合抗體效價>1:512;②有過死胎史,尤其因溶血病致死者;③胎動、胎心率有改變,提示繼續(xù)妊娠對胎兒已不安全;④羊水呈深黃色或膽紅素含量升高。

(二)產(chǎn)時處理

爭取自然分娩,避免使用鎮(zhèn)靜、麻醉劑,以免增加胎嬰兒窒息機(jī)會。做好新生兒搶救準(zhǔn)備。娩出后立即斷臍,以減少進(jìn)入兒體內(nèi)的抗體,并留臍帶約10cm長,以備注藥或必要時換血用。胎兒出生后,立即從臍靜脈注入25%葡萄糖10ml、維生素C100mg、尼可剎米125mg及/或氫化考的松25mg。另留胎盤側(cè)臍血送檢血型、膽紅素、特殊抗體測定及紅細(xì)胞、血紅蛋白和有核紅細(xì)胞檢查等。

(三)新生兒處理

注意三個關(guān)鍵時間:1、初生1~2天,輕癥者注意黃疸出現(xiàn)時間,加重速度和程度。若出生時貧血嚴(yán)重,臍血血紅蛋白<12g%者,應(yīng)考慮輸血;2、2~7天,重點(diǎn)是針對并防止因高膽紅素血癥可能引起的核黃疸,應(yīng)嚴(yán)密監(jiān)視血清間接膽紅素升高的程度和速度,勿使超過發(fā)生核黃疸的臨界濃度(18~20mg%);3、產(chǎn)后2個月內(nèi),注意紅細(xì)胞再生功能障礙所致的貧血,必要時輸血。

新生兒溶血病通常是指母子血型不合,由血型抗原免疫后引起的同族免疫性溶血性疾病。包括ABO血型不合和Rh血型不合引起的溶血病。在我國ABO血型不合引起的溶血病發(fā)病較多,Rh血型不合引起的溶血病發(fā)病較少。ABO血型不合以母親血型為“O”型,小兒血型為“A”型者最多見,“B”型者次之,ABO溶血病大多第一胎就發(fā)病。Rh血型不合病兒的母親為Rh陰性血,小兒為Rh陽性血,很少第一胎發(fā)病,如母親有輸血史,小兒可第一胎發(fā)病。

新生兒溶血病的癥狀輕重差異很大。一般來說Rh血型不合者癥狀重,ABO血型不合大多癥狀較輕,少數(shù)癥狀重。溶血嚴(yán)重者出生時已有嚴(yán)重貧血,全身水腫,可發(fā)生心力衰竭,有的甚至為死胎。小兒常在出生后第1天或第2天出現(xiàn)黃疸,迅速加重,黃疸出現(xiàn)越早,發(fā)展越快,病情越重。ABO溶血病兒多為輕度貧血,Rh溶血的小兒貧血嚴(yán)重,可導(dǎo)致心力衰竭。大多數(shù)病兒除黃疸、輕度貧血外無其他表現(xiàn),嚴(yán)重者有吃奶減少、嗜睡。小兒還有肝、脾臟腫大。如果溶血較重,血中膽紅素濃度達(dá)到340μmol/L以上,可能發(fā)生核黃疸。

如果小兒黃疸出現(xiàn)早,很快加深,由于新生兒血腦屏障功能差,血中膽紅素高達(dá)340μmol/L以上時,就會發(fā)生核黃疸 - 即膽紅素腦病,損害中樞神經(jīng)系統(tǒng),幸存的小兒留有腦性癱瘓和智力發(fā)育障礙等后遺癥。如果母親過去有不明原因的流產(chǎn)、早產(chǎn)、死胎,或上一胎有新生兒重癥黃疸,或確診為新生兒溶血病者,應(yīng)警惕本次妊娠有母子血型不合可能,要做好產(chǎn)前檢查。如果母親為“O”型或Rh陰性血,應(yīng)在懷孕28、32、36周分別到醫(yī)院檢查抗體和抗體濃度,如果抗體為陽性,抗體濃度高則小兒發(fā)生溶血病的可能性極大,可給母親服用退黃中藥,生產(chǎn)前1~2周加服苯巴比妥可減輕新生兒黃疸。

發(fā)生新生兒溶血病,特別是Rh溶血可能性極大的產(chǎn)婦,如果腹圍過度增大,體重增加超過正常,在懷孕35周以后應(yīng)到醫(yī)院檢查羊水,如果羊水中膽紅素濃度含量較高,其他檢查說明胎兒肺臟發(fā)育成熟時,可在35~38時引產(chǎn),存活率較高。生產(chǎn)時應(yīng)做好搶救準(zhǔn)備,防止小兒發(fā)生新生兒窒息,胎兒出生后盡早結(jié)扎擠帶,可減輕黃疸。出生時或出生后12小時內(nèi)有嚴(yán)重貧血、全身水腫和心力衰竭的病兒應(yīng)立即給氧、利尿、強(qiáng)心治療,情況穩(wěn)定后盡快換血。一般小兒使用藍(lán)光照射,用加速膽紅素代謝和排泄的藥物,例如苯巴比妥、激素、中藥、白蛋白或血漿等可使小兒黃疸逐漸減輕。如果血中膽紅素超過340μmol/L時應(yīng)給小兒換血,防止引起膽紅素腦病。

相關(guān)療法

預(yù)防核黃疸有下列三種方法:⑴藥物加速膽紅素的正常代謝和排泄;⑵光照療法變更膽紅素排泄途徑;⑶換血療法機(jī)械性地去除膽紅素;致敏紅細(xì)胞和抗體。

1.藥物療法

⑴激素、血漿、葡萄糖綜合療法腎上腺皮質(zhì)激素能活躍肝細(xì)胞的酶系統(tǒng),促進(jìn)葡萄糖醛酸與膽紅素結(jié)合,亦能抑制抗原機(jī)體反應(yīng),以減少溶血;白蛋白能與游離膽紅素結(jié)合使之不易透過血腦屏障,故可用強(qiáng)的松2.5mg,每日3次口服,或氫化考的松10~20mg靜滴及25%白蛋白20ml或血漿25~30ml靜滴等。

⑵苯巴比妥5mg/kg,每日3次口服,5-7天。

⑶中藥三黃湯茵陳9g、制大黃1.5g、黃芩4.5g、黃柏4.5g、山梔3g、煎服,有解毒利膽作用。

2.光照療法

光照療法可使間接膽紅素氧化分解為水溶性產(chǎn)物雙吡咯和膽綠素,從膽汁和尿中排出。光照波長以425~475mμ蘭光為好。如沒有蘭光也可用日光燈管作白光照射,效果稍差。光照24小時血清膽紅素未下降或反上升者,應(yīng)考慮換血。

3.換療法

對產(chǎn)前診斷明確,胎兒出生后癥狀、體征明顯者,經(jīng)治療膽紅素繼續(xù)上升接近18mg%者,考慮換血。

血型組合

O·AB組合

O型和AB型在氣質(zhì)上的相同點(diǎn)太少,特別對于O型血丈夫來說,AB型血妻子將永遠(yuǎn)是猜不透的謎。這也許是最典型的雖不理解,卻互相吸引的男女關(guān)系。

AB型血人,將A型與B型相矛盾的氣質(zhì)集于一身,所以他們的性格具有用只言片語說不清楚的復(fù)雜性。而對O型血人來說,處理暴露在表面的問題的能力可能比別人強(qiáng)一倍,而遇到藏在暗中的活動,不能抓住的對手,就無能為力了。

AB型血妻子是非常細(xì)致的,對別人帶有惡意的言行極為敏感。她決不暴露自己,在表面上有意待人很親熱,并裝出很憨厚的樣子,以此來保護(hù)自己。不過,在家里自然就不用戴著假面生活了。所以,不可否認(rèn),AB型血妻子在家的表現(xiàn)要比在外面差一些,往往會不知不覺地表現(xiàn)出對家人的態(tài)度比對外人的態(tài)度要壞的傾向。所以,做丈夫的就必須有思想準(zhǔn)備,防備由于妻子莫明其妙的不高興給自己帶來的各種煩惱。

比如,夫妻倆去選購窗簾。丈夫因?yàn)橥浟似拮釉f過要買綠色的,便指著茶色的說:”這個挺好?!坝谑瞧拮恿⒖滩桓吲d了:”你總是什么都不聽我的!“這突如其來的責(zé)備,使丈夫簡直不知發(fā)生了什么事,于是只得糊里糊徐地由妻子說了算了。

O型與AB型血人都是極自信的人,只有自己才正確的觀念是很強(qiáng)的。不善于向?qū)Ψ阶龀鲎尣剑詿o論是什么事往往都會各走各的路,彼此間總是不一致。

作為妻子都是想對丈夫撒嬌,想得到丈夫的謙讓的。而O型血丈夫是很粗心的人。往往不能滿足內(nèi)心纖細(xì)的妻子的要求,所以難免處處發(fā)生摩擦。他們就是這樣的不夠和諧的一對。當(dāng)然,不太敏感的O型血人在一定意義上,對AB型血人來說,是個很快活的同伴。這樣較缺乏融和性的兩個人之所以能結(jié)婚,是有強(qiáng)有力的、互相吸引的東西在起作用。有的O·AB型血夫妻,外表看好像是各干各的,可他們卻互相認(rèn)可、彼此尊重各自的一切。

AB型血人對O型血人來說是強(qiáng)者,所以自然就形成了對O型血丈夫心理上的壓力。作為妻子,與其一味地指責(zé)丈夫的粗枝大葉,不如傾其全力于他們的小天地,才會使他們的生活美滿起來。不要毫無顧忌地講丈夫的壞話,尤其在孩子面前,要貶低丈夫,那樣會給孩子的教育造成不良影響。在一個家庭中,樹立父親的形象是很必的。

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